近日，由中国检验检测学会牵头组织的《基于核酸等温扩增的病原微生物检测技术要求》团体标准正式完成编制，旨在推动病原微生物检测技术的标准化进程，提高检测技术的准确性和可靠性，为疫情防控和公共卫生安全提供有力支持。翌圣生物凭借在分子酶领域深厚的技术积淀与行业影响力，作为该团体标准的主要起草单位，全程参与标准制定工作，为推动行业高质量发展贡献专业力量。
基于核酸等温扩增的病原微生物检测技术是一种新兴的核酸检测方法，可以在恒定的温度下快速扩增核酸片段，从而实现对病原微生物的快速检测。相比传统的PCR和qPCR等基于温度变化的核酸扩增方法，此技术具有更高的操作简便性、更短的检测时间和更低的试剂成本。
目前等温扩增技术已从实验室逐渐走向检验一线，覆盖包含临床传染病检测、疫情防控、海关检疫、食品与药品安全检测、环境监测等各种领域。翌圣生物作为生命科学工具供应商，为等温扩增LAMP/RT-LAMP/RPA等体系匠心开发全系列高品质高性能的核心原料酶，助力客户开发适配各种终端应用场景的分子诊断试剂，为疾病预防、诊断和治疗提供有力的技术保障。
01
荧光法高灵敏耐热LAMP体系
基于国家项目《高性能等温扩增核心酶与量产工艺开发》，翌圣与苏州医工所和华东理工三方联合，通过ProStaB/FADS的高通量双功能酶分子改造平台，共同开发了全系列高温耐热等温扩增核心酶，在高温（70℃）条件下提升了反应扩增效率、增强扩增灵敏度和特异性、提高了实验稳定性。以下为高灵敏耐热Bst DNA聚合酶（Cat#14410ES）的部分数据展示：
扩增速度快
图2. 14410扩增性能测试
以非洲猪瘟DNA为模板，添加量为10 ng/T，各厂家Bst单酶搭配各自buffer体系，翌圣 Bst酶14410扩增Ct值均小于Supplier A和Supplier B，表明14410扩增速度更快。
灵敏度高
图3. Bst酶14410灵敏度测试
以gDNA为模板，搭配翌圣13762的buffer体系，考察14410在65℃和70℃的扩增能力。图a添加量为2ng/uL的模板，图b模板浓度梯度降低，结果表明：14410可耐受70℃的LAMP反应，且提高温度，检测Ct值显著缩小，表明耐热Bst酶可进一步提升体系的灵敏度。
02
pH显色法RT-LAMP体系
pH显色法RT-LAMP是将可视染料作为敏感指示剂，在60-65℃等温条件下，利用恒温水浴锅或普通PCR仪完成一步法RNA核酸扩增。30min即可通过反应后颜色的变化，判断是否感染病原体，结果更直观（阳性为橙黄色，阴性为洋红色）。该方法适用于大批量人群的快速检测。以下为PH显色法RT-LAMP体系（Cat#13906ES/13920ES）的部分数据展示：
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等温扩增相关产品推荐
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产品类型 |
产品功能 |
产品名称 |
货号 |
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LAMP试剂 |
荧光染料法 |
RT-LAMP Dye Assay Kit（UDGplus） |
13762ES |
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pH指示剂法 |
13906ES |
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pH法可冻干 |
RT-LAMP pH Sensitive Dye Chromogenic Version Freeze-Dryable Kit |
13920ES |
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Bst酶 |
含甘油 |
Hieff® Super Bst DNA Polymerase（2,000 U/μL） |
14410ES |
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含甘油 |
Hieff® Super Bst DNA Polymerase（120 U/μL） |
14411ES |
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含甘油 |
14402ES |
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可冻干 |
14405ES |
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RPA原料 |
Bsu聚合酶 |
11078ES |
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重组酶 |
11079ES |
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重组蛋白 |
11080ES |
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单链结合蛋白 |
11081ES |
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肌酸激酶 |
14502ES |